Author: DGI
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Rio Grande/RS, Brasil, 23 a 25 de outubro de 2013.

Desenvolvimento e caracterização de um nanocarreador lipídico contendo quercetina

Monteiro,  Samantha Oliveira; HÄDRICH, Gabriela; BAISCH, Ana Luiza Muccilo
DORA,  Cristiana Lima  (orientador)
Samantha-omonteiro@hotmail.com

Evento: Congresso de Iniciação Científica
Área do conhecimento: Nanobiotecnologia
Palavras-chave Quercetina; nanotecnologia; nanoemulsão lipídica 

1 INTRODUÇÃO

A quercetina (QU) é um flavonóide presente em diversos alimentos habitualmente consumidos pela população que apresenta propriedades anti-inflamatórias, antioxidante e anti-tumoral porém não apresenta uso clínico em decorrência da sua baixa biodisponibilidade (MANACH, 2004; MOON, 2008). Desta forma, a incorporação da QU em sistemas de liberação de fármacos é uma alternativa promissora para administração oral deste composto uma vez que aumentaria seus níveis plasmáticos, permitindo a chegada do fármaco ao tecido alvo no organismo. Existem diversos tipos de nanocarreaores, entre eles os nanocarreadores lipídicos, em especial as nanoemulsões, tem sido extensivamente estudados em função da sua alta biocompatibilidade com os tecidos (DORA, 2012). Desta forma, o objetivo deste trabalho é realizar um estudo de formulação variando as proporções dos componentes de uma nanoemulsão lipídica com intuito de aumentar a capacidade de encapsulação de QU e caracterizá-la físico-quimicamente para que posteriormente sua atividade farmacológica possa ser avaliada.
 2. MATERIAIS E MÉTODOS
2.1. Preparo e caracterização da nanocroemulsão de quercetina (QU-NE) 
A nanoemulsão foi preparada pela técnica de difusão de solvente à quente associada a temperatura de inversão de fases (DORA et al., 2012). Visando incorporar uma maior quantidade de fármaco na nanoemulsão foi realizado um estudo de formulação testando diferentes concentrações dos componentes óleo de rícino (OR-lipídio) lecitina (LEC-surfactante), estearato de PEG (surfactante) e quercetina (QU-fármaco). O tamanho médio das partículas, o índice de polidispersão e o potencial zeta das nanoemulsões foram avaliados pelos métodos de espalhamento de luz e anemometria laser doppler, respectivamente (Zetasizer). As análises de morfologia foram realizadas por microscopia eletrônica de transmissão (TEM) e por crio microscopia de transmissão (crio-TEM). A analise do teor e recuperação da QU na nanoemulsão foi realizada por espectroscopia UV/VIS (375nm) após a técnica ser validada quanto à especificidade, linearidade e limites de detecção e quantificação. 
2.2. Avaliação do perfil de liberação da quercetina a partir dos nanocarreadores
Sacos de diálise com 2 mL de QU-NE foram colocados em um meio de liberação (álcool:água; 35:65) de modo a manter as condições sink. O meio foi mantido a 37 °C sob agitação mecânica. Amostras foram coletadas em tempos pré-determinados e analisadas por HPLC.
3.	RESULTADOS e DISCUSSÃO 
Diferentes formulações foram testadas com intuito de incorporar maiores quantidades de quercetina. As análises indicaram que as variações dos componentes da formulação não alteraram o tamanho das partículas nas formulações QU-NE 10, 15, 20, e 30C sendo que as mesmas se mantiveram monodispersas (PDI<0,3) com um tamanho médio de 19nm (Tabela 2). As demais formulações testadas não apresentaram boa estabilidade. A partir desses resultados foram avaliados teor de fármaco e a porcentagem de recuperação por espectroscopia UV/VIS, sendo que na formulação QU-NE 30C foi possível encapsular 1,5mg/mL de quercetina. O ensaio de liberação de QU a partir dos nanocarreadores foi realizado com as formulações QU-NE 20 e 30C indicou que a liberação ocorreu em 24hs.
Tabela 1 – Estudo de formulação
Nanoemulsão | Estearato de PEG (%) | OR(mg) | LEC(mg) | QU(mg)
QU-NE 10 | 1,2 | 100 | 10 | 10
QU-NE 15 | 1,2 | 100 | 10 | 15
QU-NE 20 | 1,2 | 100 | 10 | 20
QU-NE 25 A | 1,2 | 100 | 10 | 25
QU-NE 25 B | 1,2 | 120 | 10 | 25
QU-NE 30 A | 1,2 | 100 | 20 | 30
QU-NE 30 B | 1,2 | 120 | 20 | 30
QU-NE 30 C | 1,5 | 150 | 20 | 30
Tabela 2 - Resultados das análises do tamanho de partícula, índice de polidispersão, potencial zeta, teor e recuperação de quercetina

Nanoemulsão | Diâmetro médio (PDI) | Potencial zeta | Teor (µg/ml) | Recuperação (%)
QU-NE 10 | 18,67 (0,12) | -2,12± 1,0 | 495,8±25,5 | 99,3±5,2
QU-NE 15 | 18,24 (0,16) | -5,14±0,8 | 718,6±15,7 | 95,8±2,1
QU-NE 20 | 18,93 (0,19) | -4,81±1,4 | 1010,9±31,9 | 100,9%±3,2
QU-NE 25 | 19,05 (0,20) | -4,95±0,8 | 1261,9±24,1 | 101,0±2,0
QU-NE 30 | 19,25 (0,20) | -5,34±0,5 | 1440,8±21,1 | 96,1%±0,1

4.	CONCLUSÕES

Os resultados indicaram que a formulação QU-NE 30C apresentou uma grande quantidade de quercetina encapsulada mantendo sua estabilidade, seu tamanho e o perfil de liberação e, portanto esta formulação deve ser utilizada nos experimentos para avaliação da atividade farmacológica.

5.	REFERÊNCIAS

MANACH, C. Am. J. of Clinical Nutrition, 79, 727-747, 2004.
MOON, Y. J. et al. Biopharmaceutics & Drug Disposition, 29 (4), 205-217, 2008.
DORA C.L., SILVA L.F.C, TAGLIARI M. e SILVA M.S. Lat. Am. J. Pharm. 30 (2), 289-96, 2011.
DORA, C. L. et al. Journal of Biomedical Nanotechnology, v. 8, p. 1-9, 2012